检测物质:
粗蛋白(凯氏定氮);真蛋白(凯氏定氮);蛋白(福林酚);蛋白(双缩脲);粗蛋白(鲜肉冻肉肉制品);粗蛋白(昆虫等含甲壳素);酸溶蛋白;挥发性盐基氮
应用领域、样品例、样品形式:
应用领域:农业、食品、药学、医学
样品例:食品(饲料)原料、发酵豆粕、植物种子、农产品(玉米、小麦、茶叶、花生等)、农副产品(醋糟、酒糟、酱油渣等)、污水、禽类肉及内脏 羽毛等、乳制品(奶粉、奶酪、奶油)、菌粉、藻类蕈菌、宠粮、宠物零食,有机废水;
动物性饲料原料(鱼粉、蛋白粉、肉粉等)、肉制品(冻肉、鲜肉、腌肉)、油酱制品(耗油、虾油、虾酱、酱油等)、罐头制品、发酵物(饲料、腐乳、纳豆)、土壤、宠粮、宠物零食;
样品形式:固体粉末;液体;新鲜动物性样品;固体小颗粒
检测原理、标准、内容、意义及样品量:
序号
项目名称
检测原理
参考标准和方法
检测意义
检测包括内容
样品量
备注
1
凯氏定氮
GB 5009.5-2016 食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定
一些含氮物质可能也会被检测到,按蛋白计算。所以叫粗蛋白
2
挥发性盐基氮
挥发性盐基氮,部分步骤同凯氏定氮。因其可在碱性溶液中高温蒸出,故前处理后,进行碱性蒸馏。转变为氨气,冷凝后硼酸吸收形成硼酸铵,经氢氧化钠滴定和换算进行定量。
GB 5009.228-2016 食品安全国家标准 食品中挥发性盐基氮的测定
说明动物性样品腐败程度;肉类的新鲜度
样品前处理;蒸馏;滴定定量
固体5-20g;液体10-20mL
新鲜动物性样品,邮寄时保证低温条件。腐败后指标上升很快
3
蛋白(福林酚)
此法的显色原理与双缩脲法是相同的,只是加入了第二种试剂,即Folin—酚试剂,以增加显色量,从而提高了检测蛋白质的灵敏度。这两种显色反应产生深蓝色的原因是:在碱性条件下,蛋白质中的肽键与铜结合生成复合物。 Folin—酚试剂中的磷钼酸盐—磷钨酸盐被蛋白质中的酪氨酸和苯丙氨酸残基还原,产生深蓝色(钼兰和钨兰的混合物)。在一定的条件下,蓝色深度与蛋白的量成正比。
福林酚法测定蛋白含量是一种广泛用于生物化学实验室和医疗检测室中的检测技术,它可以有效地检测蛋白的含量
试样制备、标曲绘制、样品测定
1g-5g固体试样或液体试样
通常测定范围是20-250μg。此法可检测的最低蛋白质量达5μg。
4
蛋白(双缩脲)
利用三氯乙酸沉淀样品中的蛋白质,将沉淀物与双缩脲试剂进行显色,通过分光光度计测定显色液的吸光度值,采用外标法定量,计算样品中蛋白质含量。
NY/T 1678-2008 乳与乳制品中蛋白质的测定 双缩脲比色法
双缩脲法是一种常用的蛋白质定量测定方法,主要用于测定生物样品中蛋白质的含量。通过该方法,可以了解样品中蛋白质的浓度,进而评估其营养价值或进行相关的生物分析。
试样制备、标曲绘制、样品测定
1g-5g固体试样或液体试样
检出限为5×10^-5g/100g(不适合微量蛋白的测定)
5
酸溶蛋白
试样用三氯乙酸溶液提取,经离心后,用凯氏定氮法测定提取液中粗蛋白质含量
NY/T 3801-2020 饲料原料中酸溶蛋白的测定
酸溶蛋白是从蛋白质中分离出来的,能够被胃部酸性环境消化吸收,相比于其他蛋白质更易于被动物吸收利用。同时,酸溶蛋白具有优秀的氨基酸组成,特别是含有较高比例的赖氨酸和色氨酸等对动物生长和免疫系统具有重要作用的氨基酸。
试样制备、测定(半微量法或全量法)
5g-10g固体试样或液体试样
凯氏定氮法和氨基酸分析法均可
危化试剂:硫酸、氢氧化钠、硼酸
危化设备:电炉、消化炉