检测物质:
氨基酸17种(水解、游离):天冬门氨酸(Asp);苏氨酸(Thr);丝氨酸(Ser);谷氨酸(Glu);脯氨酸(Pro);甘氨酸(Gly);丙氨酸(Ala);胱氨酸(Cys);缬氨酸(Val);蛋氨酸(Met);异亮氨酸(Ileu);亮氨酸(Leu);酪氨酸(Tyr);苯丙氨酸(Phe);组氨酸(His);赖氨酸(Lys);精氨酸(Arg)
色氨酸(荧光法);天冬酰胺+谷氨酰胺;牛磺酸;β-羟脯氨酸
应用领域、样品例、样品形式:
应用领域:农业(种子、饲料)、食品、水产、医药、生化、医学等领域。
样品例:食品(饲料)原料、发酵豆粕、植物种子、农产品(玉米、小麦、茶叶、花生等)、农副产品(醋糟、酒糟、酱油渣等)、污水、禽类肉及内脏 羽毛等、乳制品(奶粉、奶酪、奶油)、菌粉、藻类蕈菌、土壤。宠粮、宠物零食
样品形式:固体粉末、固体小颗粒、膏体、液体
检测原理、标准、内容、意义及样品量:
序号
项目名称
检测原理
参考标准和方法
检测意义
检测包括内容
样品量(有条件就多给些)
备注
1
17种氨基酸 水解(水解)
样品经过高温酸解,这17种氨基酸转变为单个游离状态。经过分离柱分离后,按顺序出柱,经过与茚三酮反应显色,再通过检测器检测,计算机读数形成图谱。根据标品和样品的图谱峰面积计算氨基酸含量。
GB 5009.124-2016 食品安全国家标准 食品中氨基酸的测定
分析含蛋白/氨基酸整体样品中各氨基酸含量和组成
提供大概蛋白含量。如果未知无法提供,建议增加一个凯氏定氮测试项目。
2
17种氨基酸 (游离)
液体样品,或固体样品进过水提、醇提等得到的提取液,经简单前处理后,上样检测。经过分离柱分离后,按顺序出柱,经过与茚三酮反应显色,再通过检测器检测,计算机读数形成图谱。根据标品和样品的图谱峰面积计算氨基酸含量。
GB 5009.124-2016 食品安全国家标准 食品中氨基酸的测定
分析样品中小分子的、游离的氨基酸含量和组成。
液体5-10mL(蛋白含量最好大于1g/100mL)
提供大概蛋白含量。如果未知无法提供,建议增加一个凯氏定氮测试项目。
3
色氨酸(水解)
在蛋白碱水解后,只有色氨酸、酪氨酸可检测到荧光,且pH11时色氨酸荧光强度是酪氨酸100倍,两者荧光峰差40nm。根据此特点,碱水解处理后可检测色氨酸含量。
GBT14924.10-2008 实验动物 配合饲料氨基酸的测定
检测样品中色氨酸含量
提供大概蛋白含量。如果未知无法提供,建议增加一个凯氏定氮测试项目。
4
色氨酸(荧光法)
采用碱水解法处理样品,特定pH、接收波长、发射波长下的色氨酸荧光强度与含量成正比。通过荧光强度和标准曲线计算得到色氨酸含量。
GBT14924.10-2008实验动物 配合饲料 氨基酸的测定
色氨酸定量分析
提供大概蛋白含量。如果未知无法提供,建议增加一个凯氏定氮测试项目。
5
天冬酰胺、谷氨酰胺(水解、游离)
谷氨酰胺肽的制备及其性质的研究_陈思思
检测样品中天冬酰胺和谷氨酰胺的含量
进行两次测试,一次与碘苯反应,一次正常测试。测差值并计算
提供大概蛋白含量。如果未知无法提供,建议增加一个凯氏定氮测试项目。
6
牛磺酸
样品中牛磺酸经提取、沉淀蛋白后 ,上清液经丹磺酰氯衍生化,通过好笑也想色谱测定。外标法定量
牛磺酸可以显著提高运动机能,延缓消除运动后产生的疲劳。但需控制使用量。检测定量是关键
提取;衍生化;上机跑样测定;数据定量分析
HPLC需带荧光检测器或二极管矩阵检测器
7
羟脯氨酸
样品经过高温酸解,羟脯氨酸释放转变为单个游离状态。经过分离柱分离后经过与茚三酮反应显色,再通过检测器检测,计算机读数形成图谱。根据标品和样品的图谱峰面积计算氨基酸含量。犹豫存在出峰重叠,故需单独跑样(不在17种氨基酸中)
GB 5009.124-2016 食品安全国家标准 食品中氨基酸的测定
羟脯氨酸定量分析
提供大概蛋白含量。如果未知无法提供,建议增加一个凯氏定氮测试项目。
所用危化试剂及设备:
危化试剂:盐酸、氢氧化钠、甲醇、硼酸、茚三酮、乙腈、冰乙酸、盐酸甲胺、丹磺酰氯
危化设备:烘箱或加热设备(过夜高温酸解)