2024-11-17 11:52:53 阅读量:40
一、什么是氨基酸分析
氨基酸检测是一种生化分析方法,用于测定样品中氨基酸的种类和含量。广泛应用于医学、农业、食品、医药、饲料、化妆品等与人类生活和健康密切相关的行业。目前使用最多的是17种氨基酸含量检测。
二、氨基酸分析常用哪些仪器设备?
(1)全自动氨基酸分析仪
这是专门用于氨基酸分析的仪器,能够对样品中的氨基酸进行定性和定量分析,其本质是台功能专一的液相设备,能够在一次跑样过程中完成多种氨基酸的分析。在样品经过酸解前处理后,全自动氨基酸分析仪可以自动完成样品的进样、分离、检测和数据处理等一系列操作,大大提高了工作效率,减少了人为误差。全自动氨基酸分析仪主要通过茚三酮柱后衍生完成检测。
(2)高效液相(LC)
液相色谱法基于样品中各氨基酸在两种不同介质之间的分配系数差异进行分离。不过液相设备本身管路为不锈钢材质,无法长期抵抗酸性流动相的侵蚀,故不能长期大量进行氨基酸分析工作。一般通过衍生试剂(领苯二甲醛(OPA)、氯甲酸芴甲酯(FMOC-CI)、异硫氰酸苯酯(PITC)、丹酰氯(Dansyl-CI)、2,4-二硝基氟苯(FDNB))在进样分析前对样品进行衍生处理(柱前衍生)。该方法存在操作复杂、成本高,在使用时需要自行调整和建立合理的检测条件,适合用于进行非常规氨基酸含量的检测。
(3)液相质谱(LC-MS)
LC-MS法测定体内化合物,具有选择性好,灵敏度高,分析时间短等优点,已普遍地应用于生物体内研究。基于氨基衍生标记的LC-MS/MS氨基酸定量技术和传统方法相比,从准确度、精密度、检测范围和检测结果都有了很大的提高和改善。但使用该方法时,设备维护和做样的成本极高。
(4)毛细管电泳
根据分离原理的不同,可分为毛细管区带电泳、毛细管凝胶电泳、毛细管等电电泳、毛细管等速电泳以及胶束电动力学毛细管电泳。其中,毛细管区带电泳和胶束电动力学毛细管电泳可用于氨基酸检测。毛细管电泳法具有分离效率高、分析时间短、溶剂用量少、无须梯度洗脱以及适用于氨基酸的手性分离等特点但该方法分析结果重现性较差。